1、培养料的种类 蘑菇的培养料主要有粪草培养料、合成培养料和半合成培养料三种。应用最普遍的是粪草培养料。其基本的原料有下列几种：
①秸秆类 稻草、麦秆是栽培蘑菇的主要原料。此外，玉米秆、甘蔗渣、油菜壳和豆科作物的茎秆等都可作为堆制培养料的原材料，但要足干和无霉烂，已经变质的不能采用。稻草以糯稻草和杂交水稻草为最好，常规稻的晚稻草其次，早稻草质量较差。大麦杆和稻草养分充足，腐熟容易。小麦秆、甘蔗渣质硬，不易腐熟，但通气性好。堆料时通常将稻草和麦秆混合使用的培养料比使用单一草料的质量较好。加以稻草和小麦秆混合使用，应先把小麦秆和粪肥先堆一星期后，再堆稻草。
②粪肥 主要为马、牛、猪的粪便及人粪尿等。马粪有机质丰富，质地疏松，富有弹性，保温、保水性能好。堆料时发效快，温度高，腐熟性好，是栽培蘑菇的好材料，但来源不多。目前广泛应用的是来源比较充足的猪、牛粪。猪粪性冷，含氮量较高，牛粪性热，含氮量较低，两者混合使用，可以互相弥补，使培养料养分足，肥效长。牛粪质粘，湿粪堆料，形成粪块，不易打散，故宜晒干敲碎后使用。目前由于蘑菇栽培面积不断扩大，猪、牛粪也供不应求，以人粪尿来代替部分猪、牛粪已有应用，并收到良好的效果。此外，羊、兔、鸡、鸭等的粪便， 都可用来堆制培养料栽培蘑菇。
③添加料 堆料中常加部分饼肥、尿素、硫酸铵、过磷酸钙、石灰、石膏等，以增加培养料的养分和改善培养料的理化性质，如调节酸碱度，防止培养料发粘和氮素损失，以及消毒杀菌作用（如石灰）。
2、 培养料的配方 培养料的配方是根据蘑菇生长发育对养分的要求（包括一定的碳氮比），进行合理搭配的成分。常用的培养料配比有以下几种：
①粪草培养料 是以稻草、麦秆和粪肥为主要材料，附加少量的添加料堆制而成的。粪草的比例有6：4、5：5和4：6 等不一。一般每一百平方米的栽培面积，需要粪草干重3,500～4,500公斤，可参照表8的配比进行备料。
②半合成培养料 主要是增加草料，减少粪料，适当增 加些添加料堆制而成。
③合成培养料 只有稻秆类和添加料为原料，不用粪肥。
3、培养料的堆制和发酵 用于栽培蘑菇的培养料是先通过粪草的堆制和各类微生物共同参与活动的结果，所以培养料的堆制过程也就是发酵的过程。堆料一开始，各类微生物的消长就有秩序的进行着。先是一些中温性的微生物如细菌、藻状菌等的活动，它们适应的温度范围在20～38℃利用 堆料中简单的有机物，分解果胶质等（不分解纤维素），并放出大量的热能，使温度逐渐升高，这种热称为生物热。
当温度升到40～50℃时，一些耐温性微生物如腐植霉等真菌，开始活动；它们能分解堆料中的纤维素和木质素。当温度继续升高到50～60℃时，一些嗜热性微生物；主要是嗜热放线菌包括链霉菌、嗜热单孢菌和无芽孢的假单孢杆菌等进行活动，它们也分解纤维素和木质素，利用了堆料中游离的糖分和固定了游离氨，同时所产生的抗菌素有抑制其它杂菌生长的作用。所以培养料经过堆制和发酵可以达到以下两个目的：一是创造一个适于蘑菇生长而不适于其他杂菌生长的环境。即无害化的培养料；二是由嗜热放线菌所产生的多糖类、微生物蛋白（氨基酸）、维生素（硫脸素、烟酸等）及生物激素等，可供蘑菇直接利用或刺激蘑菇菌丝的生长。
①堆料时间和方法 培养料的堆制一般是在当地适宜播种期前一个月进行。具体做法是在堆料前一天，将稻草（或麦秆）用水浸泡，牛粪敲碎用尿水调湿，先在地面上铺一层宽2米，厚20厘米，其长度不限的草料，然后铺上一层5～6厘米厚的粪肥，粪草都要铺平，这样一层草一层粪，依次堆积，直至堆高1.5米为止。堆的四周上下基本垂直或略成梯形，堆顶成龟背形。堆料时，要边堆边分层适当浇水，水要浇在草上。堆后于顶部盖上草或塑料薄膜，以防雨淋日晒，养分散失。一般在堆后次日，堆基四周会有少量水分流出。
②翻堆 翻堆的目的是可使培养料发酵均匀，散除堆中臭气，并结合调节水分。通常翻堆4～5次。
第一次翻堆是在堆料后6～7天、当温度高达70～80℃， 开始下降时即可进行。翻堆时要将下面的粪草翻到上面，四周的翻到中间，并充分抖松拌和。添加料中的氮肥如硫酸铵、人粪尿、尿素等应在堆料或第一次翻堆时加入，以供堆料中的微生物利用。如添加太迟，微生物利用不完全，进料时，游离态氨太浓，不利蘑菇菌丝生长。过磷酸钙于第一次翻堆时加入，对促进微生物活动和固定氮素也是十分有益的。第一次翻堆要浇足水，一般以用手紧握粪草指间能滴出6～7滴水为宜。第二次翻堆是在第一次翻堆后的5～6天进行。这次翻堆要均匀加入石膏粉以调节培养料的理化性，促进微生物活动和增加硫、钙等成分。当第二次翻堆时，粪草已初步腐熟，容易吸水，加水时不宜过多，以防培养料变黑、发臭和堆温不高。湿度以手紧握培养料能滴出2-3滴水为宜。
以后隔4～5天、3～4天翻第三次、第四次以至第五次。 每次翻堆相隔时间掌握由长而短，依次递减。水分的调节控制先湿后干，最后一次翻堆，培养料适宜的含水量为65％，即以手握紧培养料，指缝间有水滴而又滴不下为宜。并要求在最后一两次翻堆时调节好。在最后一次翻堆时每百平方米栽培面积的培养料中加入1.5公斤福尔马林和0.25公斤敌敌畏，用塑料薄膜盖严以杀灭堆料中的杂菌和害虫。
